匀浆仪,针对中药药材DNA提取的研磨方法

实验目的通过提取药材的DNA,匀浆仪进行DNA条形码分子对照,进而鉴定中药。实验原理,通过对照药材自身独有的DNA条形码记录,可以准确鉴定出中药材品种。用DNA条形码分子法鉴定中药是药典中一项重要的鉴定方法。实验材料和器具样品:甘草,陈皮,阿胶饮片仪器:高通量组织研磨仪耗材:不锈钢研磨罐(上海净信,10研磨单位),研磨珠.实验步骤1.研磨样品1.1 分别称取甘草、陈皮和阿胶饮片各1个研磨单位;1.2 将样品分别放入研磨罐中,加入研磨珠;1.3 将研磨罐放入净信研磨仪中,设置参数14单位振频,90s,启动仪器;1.4 得到完全破壁的药材碎粉.注意事项1. 研磨罐和研磨珠需充分清洗干净并烘干备用;若需提取药材的RNA,则研磨罐和破碎珠要确保灭酶;2. 每个10研磨单位的研磨罐大约可研磨1个研磨单位药材量(具体根据样品本身的紧密度会有变动,一般样品体积不超过研磨罐容积的三分之二);3. 如果放入的样品没有脱水或者是水分含量较大的药草类,需用液氮预冷,具体操作是:把装好样品和研磨珠的研磨罐浸入液氮中,直至液氮不沸腾,再迅速将研磨罐放入研磨仪中,设置参数13单位振频,30s启动研磨仪,就能得到较好的研磨效果。较坚硬的样品无需液氮冷冻,如阿胶、鹿茸等。植物生理学其目的在于认识植物的物质代谢、能量转化和生长发育等的规律与机理、匀浆仪调节与控制以及植物体内外环境条件对其生命活动的影响。包括光合作用、植物代谢、植物呼吸、植物水分生理、植物矿质营养、植物体内运输、生长与发育、抗逆性和植物运动等研究内容。测定植物组织的成分含量是植物生理学研究中不可或缺的一部分。植物的基本组成物质如蛋白质、糖、脂肪和核酸以及它们的代谢都与其他生物(动物、微生物)大同小异。但是,植物本身又有一些独特的地方,如:①能利用太阳能,用来自空气中的 CO2和土壤中的水及矿物质合成有机物,因而是现代地球上几乎一切有机物的原初生产者。②植物扎根在土中营固定式生活,趋利避害的余地很小,必须能适应当地环境条件并演化出对不良环境的耐性与抗性。③植物的生长没有定限,虽然部分组织或细胞死亡,仍可以再生或更新,不断地生长。④植物的体细胞具全能性,在适宜的条件下,一个体细胞经过生长和分化,就可成为一棵完整的植株。因此植物生理学在实践上、理论上都具有重要的意义。实验步骤步骤1:把保存在液氮中的样品取出,稍微处理成长度不超过2CM的小片;步骤2:将称量样品装入10ml圆底离心管,加入 5MM研磨珠1颗、3mm研磨珠5-6颗、与样品质量相等的石英砂,5ml左右的提取液(或pbs, 研磨珠、石英砂及提取液视实验需求更改 )放入净信研磨仪中;步骤3:设置参数60HZ 180s就可以完全匀浆;步骤4:从净信研磨仪中取出 样本,做后续酶活 ,有机酸,糖类等弄浓度测定。

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